un peu de moi, un peu de tout... bribes d'une vie d'étudiante, d'une stagiaire de laboratoire puis d'une thésarde passionnée... bribes d'un matou pas vraiment mâté, et d'une passion cavalière déçue...
dimanche 26 avril 2009
dimanche 19 avril 2009
mercredi 15 avril 2009
votre mission, si vous l'acceptez...
... et de parvenir à faire digérer votre plasmide par vos enzymes de restriction !
Parce que j'ai un super plasmide avec mon joli petit gène d'intérêt dedans (enfin, je crois...), et que j'arrive pas en l'en sortir pour le mettre dans un autre plasmide afin de le faire surexprimer dans des cellules de Drosophile ! :( Et je n'ai que 2 sites de restriction que je peux utiliser pour y parvenir, et donc 2 enzymes que je dois utiliser, et pas d'autres !
On a tout essayé :
Parce que j'ai un super plasmide avec mon joli petit gène d'intérêt dedans (enfin, je crois...), et que j'arrive pas en l'en sortir pour le mettre dans un autre plasmide afin de le faire surexprimer dans des cellules de Drosophile ! :( Et je n'ai que 2 sites de restriction que je peux utiliser pour y parvenir, et donc 2 enzymes que je dois utiliser, et pas d'autres !
On a tout essayé :
- changer le tampon de digestion,
- faire la digestion en 2 temps, une enzyme après l'autre chacune dans son meilleur tampon,
- refaire le tampon de migration,
- on a vérifié la séquence des oligos pour les PCR,
- ...
Vraiment, on ne sait plus quoi faire !
Du coup tant pis, on laisse la manipe de côté. On oublie un moment la bio mol et on passe à de la bio cell. Histoire de se changer les idées. Se rafraîchir les neurones...
Et si, finalement, les Shadok avaient raison ?...
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